fr:protocoles:colorations_lipides_et_proteines_des_fromages
Table des matières
Microscopie lipides et protéines des fromages parmalat
Matériel
- Nile red (4 mg/ml) (200x)
- Fast green FCF (10 mg/ml) (100x)
Préparation des puits
- Diluer Nile red avec le perméat pour obtenir une concentration finale de 0,02 mg/ml
- Diluer FCF avec le perméat pour obtenir une concentration finale de 0,1 mg/ml
- Préparer un bac de glace pour maintenir constamment les échantillons à 4C
- Laisser les échantillons au frais jusqu'au moment de les préparer
- Pour chaque sac, sortir un morceau de fromage
- Dégager un cube de fromage d'environ 1 cm cube à l'aide d'un couteau
- Avec un scalpel, coupez une première tranche et mettez-la de côté
- Avec le scalpel, couper une deuxième tranche d'environ 1,5 mm d'épaisseur
- OPTION: mettre immédiatement l'échantillon dans le colorant et par tir le décompte de 10 minutes OU mettre l'échantillon bien identifié au réfrigérateur 4C et mettre les échantillons dans les puits une fois que toutes les coupes sont faites
- Déposer les échantillons dans les puits sur glace et laisser macérer les échantillons dans le colorant pendant 10 minutes
- Transférer les échantillons dans le puits d'eau mili-Q et laisser tremper une minute
- Transférer les échantillons dans les deuxièmes puits d'eau mili-Q et laisser tremper jusqu'à temps de préparer l'échantillon pour la microscopie
- Si désiré par le client, faire deux coupes par fromages, un transverse (A) et une logitudinale (B).
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